概述
　　杂环类杀菌剂类型较多，发展快，其重要的品种类型有：
　　1. 酰苯胺类衍生物：该类杀菌剂的结构中含有一个酰苯胺基。又分为两小类，一类是N－取代二甲亚胺类，二类是N－酰基－α－氨基酸类。该类杀菌剂包括纹枯利（菌核净，Dimerhachlone）、菌核利(Dichlozoline)、乙烯菌核利（Vinclozolin）甲霜灵（metalaxyl）、异菌脲（Iprodione）等常见品种。
　　2. 丁烯酰胺衍生物：其分子结构中含有丁烯酰胺的基本骨架，多为内吸杀菌剂。最代表品种是萎锈灵（Oxathiin）和氧化萎锈灵（Oxycarboxin）。
　　3. 三氯乙基酰胺衍生物：品种较少，主要有嗪胺灵（Triforine）和苯胺灵（Chleraniformethane）。
　　4. 吡啶衍生物：分子中含有吡啶环，代表品种有：吡氯灵（Pyroxychlor）。
　　5. 嘧啶衍生物：结构中含有嘧啶环，主要品种有甲菌定（Dimethirol）和乙菌定（Ethirimate）和磺菌定（Bupirimate）。
　　6. 吗啉衍生物：分子结构中含有吗啉环。代表品种有：十三吗啉（Tridemorph）、吗菌灵（Dodemorph）和丙菌灵（Fenpropimorph）等。
　　7. 苯并咪唑衍生物：结构中含有苯并咪唑母核。常见品种有：多菌灵（Carbendazim）、苯菌灵（Benomyl）、甲基托布津（Thiophanate-methy）等。
　　8. 三唑衍生物：分子结构中含有一个N－取代的三氮唑母核。代表品种有：三唑酮（Triadimefon）、多效唑（Paclobutrazol）、丙环唑propiconazole等。
　　9. 异噁唑及异噻唑衍生物：品种较少，主要有立枯灵（Hymexazol）等。
　　在以上类型中吡啶类、嘧啶类、咪唑类、哌嗪类、三唑类和吗啉类等六大类又常称为甾醇生物合成抑制剂类。甾醇是真菌细胞膜的重要组成部分，影响甾醇生物合成的杀菌剂会使菌体细胞膜的功能受到破坏，最终导致细胞死亡。在二十世纪八十年代，甾醇生物合成抑制剂成为内吸性杀菌剂的开拓性的新领域。甾醇生物合成抑制剂具有强的向顶性传导活性和明显的熏蒸作用，杀菌谱广、高效、低用量、药效期长等优点，所以已经成为杀菌剂的主要品种类型。
　　 甲霜灵的残留分析
　　该药剂属于酰苯胺类衍生物中的N-酰基-α-氨基酸类，其残留分析主要有气相色谱和高效液相色谱两种测定方法。
　　1. 气相色谱方法
　　⑴. 方法原理
　　样品用甲醇振荡提取，二氯甲烷液－液分配，酸性氧化铝柱层析净化、气相色谱法（NPD）测定。
　　⑵. 样品处理
　　①. 提取
　　将黄瓜纵向切开，每条取1/4，组织捣碎机捣碎。称40g匀浆后的黄瓜样，（土样为20g，加水10mL），放入250mL锥形瓶中，加入80mL甲醇，加塞，在振荡机上振荡提取1h，过滤，滤渣再用80mL甲醇提取1h，过滤，用甲醇多次冲洗滤渣，合并滤液。
　　②. 净化
　　液－液分配：将提取液转移到500mL分液漏斗中，加150mL水，20mL饱和氯化钠水溶液，用2×50mL的二氯甲烷提取。提取液通过装有无水硫酸钠的漏斗干燥，二氯甲烷转移到250mL圆底烧瓶中，在55℃的水浴上浓缩至2～3mL，再用氮气流吹至微干。
　　柱层析：玻璃层析柱中底部塞上玻璃棉，然后依次加入2cm厚无水硫酸钠，10g酸性氧化铝（100～200目。用前在130℃下烘12h，冷却后，加10％水脱活），2cm厚无水硫酸钠。用10mL的二氯甲烷将上述的浓缩物转移到层析柱中，用石油醚/乙醚（9:1，V/V）的混合液淋洗，弃去淋出液。再用50mL石油醚/乙醚（1:1，V/V）的混合液淋洗，收集在250mL圆底烧瓶中,在55℃水浴上浓缩至近干，再用氮气流吹干。用正己烷溶解，定容后待测。
　　⑶. 气相色谱测定
　　检测器：碱火焰离子化检测器（NPD）；色谱柱：1m（长）×2mm（内径）玻璃柱；担体：Chromosorb GAM，80～100目；固定液：3％PEG 20M；检测温度：色谱柱220℃，检测器250℃，进样口250℃；载气：氮气（≥99.99％），30mL/min；燃烧气：氢气32mL/min，空气88mL/min；保留时间：1min12s。该方法的最小检出量：2.7×10-10g；最低检出浓度：黄瓜为0.013mg/kg，土壤为0.018 mg/kg。回收率：添加0.05～0.25 mg/kg，黄瓜回收率为98.0～98.5％，土壤为94.5％。
　　2. 高效液相色谱方法
　　⑴. 方法原理
　　样品用甲醇振荡提取，二氯甲烷液－液分配，酸性氧化铝柱层析净化，高效液相色谱法测定。
　　⑵. 样品处理
　　①. 提取
　　称取50g切碎的葡萄样品（土样为20g，加水10mL），放入250mL锥形瓶中，加入70mL甲醇，加塞，在振荡器上振荡1h，过滤，用甲醇多次洗涤滤渣，合并滤液。
　　②. 净化
　　液-液分配净化：将上述提取液转移到500mL分液漏斗中，加100mL的蒸馏水和40mL饱和氯化钠水溶液，用3×50mL的二氯甲烷提取，提取液经无水硫酸钠脱水，二氯甲烷转移到250mL圆底烧瓶中，在45℃的水浴上浓缩至1～2mL，再用氮气流吹至微干。
　　柱层析净化：层析柱上下两端各放1cm厚无水硫酸钠，中间装填7g酸性氧化铝（小于80目，用前在550℃下烘4h，冷却后加入10％水脱活），用10mL石油醚预淋，再用10mL石油醚将上述浓缩液转移至柱中，用50mL石油醚/乙醚（9:1，V/V）的混合液淋洗，弃去淋出液。再用50mL石油醚/乙醚（1:1，V/V）的混合液淋洗，收集淋出液于250mL圆底烧瓶中，在45℃的水浴上减压浓缩至干。再用重蒸的甲醇溶解，定容后待测。
　　⑶. 高效液相色谱测定
　　检测器：紫外检测器（UV，波长220nm）；色谱柱：30cm（长）×4mm（内径）C18不锈钢柱；流动相：甲醇/水（80:20，V/V）；流速：1mL/min；保留时间：5min48s。该方法的最小检出量：1.6×10-10g；最低检出浓度：葡萄0.08 mg/kg，土壤为0.02mg/kg；回收率：葡萄中添加甲霜灵0.1～2.0 mg/kg，回收率为79.4％～85.5％。土壤中添加0.5～2.0 mg/kg，回收率为85.5～95.8％。
　　 乙烯菌核利的残留分析
　　该药剂属于酰苯胺类衍生物中的N－取代二甲酰亚胺类。
　　1. 方法原理
　　样品用丙酮提取，二氯甲烷分配，中性氧化铝/弗罗里硅土柱层析净化，用GC-ECD测定。
　　2. 样品处理
　　⑴. 提取
　　称取20g黄瓜捣碎样品（或过筛土样20g），加入50mL丙酮，振荡提取30min，过滤，用3×30mL丙酮洗涤合并全部提取液，浓缩至约10mL。将提取液转移至分液漏斗中（内盛2％Na2SO4水溶液50mL），用3×30mL二氯甲烷振摇液液分配，合并二氯甲烷液，并经无水硫酸钠干燥，浓缩至2～3mL。
　　⑵. 柱层析净化：
　　层析柱中上下两端各加2cm厚无水硫酸钠，中间上部加4g弗罗里硅土（60～100目，用前经130℃活化6h），下部加4g中性氧化铝（100～200目，用前经130℃活化4～6h），用30mL淋洗液（二氯甲烷/乙酸乙酯，10:1，V/V）预淋，将样品浓缩液转移至柱中，用60mL淋洗液淋洗，收集淋出液并浓缩，定容后待测。
　　3. 气相色谱测定
　　检测器：电子捕获检测器（ECD，Ni63）；色谱柱：25m(长)×0.25mm（内径）毛细管柱，固定液：OV-1701；检测温度：色谱柱200℃，检测器250℃，进样口250℃；载气：氮气（≥99.99％），流速50mL/min，尾气50mL/min；分流比：50:1；保留时间：5min49s。该方法的最小检出量：1.0×10-11g；最低检出浓度：黄瓜为0.005mg/kg，土壤为0.01mg/kg；回收率：黄瓜中添加0.2~5.0mg/kg，回收率为87.5~107.6％；土壤中添加0.2~1.0mg/kg，回收率为85.1~108.7％。
　　 异菌脲的残留分析
　　该药剂属于酰苯胺类衍生物中的N－取代二甲酰亚胺类。
　　1. 方法原理
　　水果样品切碎并经组织捣碎后，用丙酮振荡提取，二氯甲烷液－液分配，弗罗里硅土柱层析净化，GC-ECD测定。
　　2. 样品处理
　　⑴. 提取
　　每次取12条香蕉样品，分开果皮果肉，切碎经组织捣碎2min（为方便捣碎可加入适量蒸馏水），折称50g蕉肉，20g蕉皮于500mL具塞磨口三角瓶中，各加100mL丙酮，2~4g助滤剂Celite545，浸泡过夜，振荡提取30min，抽滤，残渣用50、40、30mL丙酮洗涤，抽滤，滤液浓缩去除丙酮。
　　⑵. 液-液分配净化
　　浓缩液转移到500mL分液漏斗中，加5％氯化钠水溶液50mL，加50mL二氯甲烷，振摇1min静止分层后收集下层二氯甲烷，上层液体再加40mL二氯甲烷提取，合并二氯甲烷浓缩至近干，待柱层析。
　　⑶. 柱层析净化
　　层析柱中依次从下至上加入2g无水硫酸钠，5g弗罗里硅土（用前130℃烘6h），0.5g粒状活性炭，2g无水硫酸钠，用40mL二氯甲烷预淋，然后将上述浓缩液用少许二氯甲烷溶解并转移到层析柱中，再用75mL二氯甲烷／乙酸乙酯（19:1，V/V）淋洗，淋出液浓缩近干，用甲苯定容，待测。
　　3. 气相色谱测定
　　检测器：带电子捕获检测器（ECD Ni63）；色谱柱：2m(长)×3mm（内径）玻柱，5％SE-30/Chromosorb W AW DMCS，80~100目；检测温度：色谱柱260℃，检测器350℃，进样口300℃；载气：氮气（≥99.99％）， 30mL/min ；保留时间：1min20s。该方法的最小检出量：2.0×10-10g；最低检出浓度：香蕉肉0.01mg/kg，香蕉皮0.05mg/kg；回收率：添加0.1～5.0mg/kg，香蕉肉为88.2％～105.8%，香蕉皮为82.3％～103.7%。
　 三唑酮的残留分析
　　该药剂属于三唑衍生物类杀菌剂。本方法适用于测定粮食中三唑酮的残留量。
　　1. 样品处理
　　粮食：称取30.0g粉碎过60目的样品，置于500mL具塞三角瓶中，加80mL丙酮，20mL蒸馏水，浸泡过夜后振荡提取1h，抽滤，残渣用30mL丙酮洗涤两次，合并滤液，浓缩除去大部分丙酮。将提取液转移到250mL分液漏斗中，依次加入50mL蒸馏水，10mL饱和氯化钠水溶液，40mL二氯甲烷，振摇2min。下层有机相移至250mL具塞三角瓶中。水相再用20mL二氯甲烷提取一次，弃去水相，有机相经无水硫酸钠脱水后收集在烧瓶中，在40℃水浴浓缩近干。残留物用丙酮转移到刻度试管中，定容到5mL，供GC测定。
　　2. 气相色谱测定
　　检测器：NPD；色谱柱：1.6m(长)×3mm（内径）玻柱，4％OV-17+4％OV-210/Chromosorb W AW DMCS，80～100目；检测温度：色谱柱220℃，检测器290℃，进样口290℃；载气：氮气（≥99.99％），70mL/min；燃烧气：氢气3.6mL/min，空气160mL/min。该方法的最小检出量：三唑酮2.8×10-10g，三唑醇为5×10-10g；最低检出浓度：三唑酮为0.01mg/kg，三唑醇为0.02mg/kg；添加浓度0.04~5.0 mg/kg的回收率在84.1%~103%。
　　 丙环唑的残留分析
　　该药剂属于三唑衍生物类杀菌剂。该方法用于小麦、植株、土壤中丙环唑的残留量分析。
　　1. 方法原理
　　样品用甲醇/水提取，经液－液分配，碱性氧化铝柱层析净化，气相色谱法（NPD或ECD）测定。
　　2. 样品处理
　　⑴. 提取
　　称20g小麦籽粒粉碎样品（或20g土壤样品，或10g植株样品），置于500mL具塞三角瓶中，加200mL甲醇/水（8:2,V/V）混合溶液浸泡过夜，振荡提取2h。提取液通过布氏漏斗过滤。再用2×40mL溶剂重复提取。用少量溶剂洗涤三角瓶及滤渣，合并全部滤液。
　　⑵. 液－液分配净化
　　将上述的滤液转入1000mL分液漏斗中，加200mL蒸馏水，50mL饱和氯化钠水溶液，用2×75mL二氯甲烷提取2次，收集二氯甲烷相，通过装有无水硫酸钠的漏斗，二氯甲烷收集后，在旋转蒸发器40℃水浴上浓缩近干。
　　⑶. 柱层析净化
　　层析柱底部塞入玻璃棉球，加入20mL石油醚，然后依次加入2cm厚无水硫酸钠，10g碱性氧化铝（用前650℃灼烧3h，冷却后每100g加19g蒸馏水，在旋转浓缩器中转动3h或振荡2h，储于磨口瓶中，置于干燥器内保存），2cm厚无水硫酸钠，待石油醚刚刚没过硫酸钠时，立即将上述浓缩液用2mL甲苯溶解并转入柱中，再用2×2mL甲苯洗瓶及柱壁二次，然后用50mL石油醚/二氯甲烷（6:4，V/V）淋洗、弃去淋出液；用75mL二氯甲烷／石油醚（6:4，V/V）淋洗并收集与旋转浓缩瓶中，在旋转蒸发器40水浴上蒸去溶剂，改用石油醚／乙醇（1:1，V/V）溶解残渣并准确定容至2mL，待测。
　　3. 气相色谱测定
　　检测器：氮磷检测器（NPD）；色谱柱：1m(长)×3mm（内径）玻柱；担体：Chromosorb Q，80～100目；固定液：3％Carbowax 40M；检测温度：色谱柱230℃，检测器250℃，进样口250℃；载气：氮气（≥99.99％），40mL/min；燃烧气：氢气3mL/min，空气100 mL/min；保留时间：3min36s。该方法的最小检出量：2.7×10-10g；最低检出浓度：0.01~0.03mg/kg；回收率：添加0.1~2.0 mg/kg，回收率在90.3％~94.1％。
　　腈苯唑的残留分析
　　该药剂属于三唑衍生物类杀菌剂。本方法适用于土壤及水果中腈苯唑的残留分析。
　　该药剂在环境中容易光解产生两种代谢物：RH-9129和RH-9130。在残留分析中要测定母体及代谢物。
　　1. 样品处理
　　⑴. 提取
　　称取20g水果匀浆样品或20g土壤样品，加80mL甲醇（土壤需先加水10mL），振荡30min，用60目石英砂作助滤剂抽滤，滤渣再用80mL甲醇分多次冲洗滤渣并抽滤，合并滤液。甲醇提取液中加180mL水，5mL醋酸铅饱和溶液，25mL氯化钠饱和溶液，摇匀，静置，用另一抽滤漏斗垫石英砂抽滤，再用30mL二氯甲烷冲洗滤渣并抽干。将甲醇及二氯甲烷滤液转入800mL分液漏斗中，加二氯甲烷50mL×2液-液分配，取二氯甲烷层过无水硫酸钠脱水后，在60℃水浴中减压浓缩至近干，用氮气流吹干溶剂。
　　⑵. 柱层析净化
　　湿法装柱，层析柱上下两端加2cm厚无水硫酸钠，中间加8g层析用硅胶，用10mL丙酮／石油醚（1:9,V/V）混合溶液将提取液移入柱中，再用50mL丙酮/石油醚（4:6,V/V）混合溶液淋洗，收集此部分淋出液并浓缩至干，定容后待测。
　　2. 气相色谱测定
　　检测器：氮磷检测器（NPD）；色谱柱：15m（长）×0.53mm（内径）石英交联毛细管柱，固定液为DB-35；检测温度：色谱柱250℃，检测器270℃，进样口270℃；载气：氮气（>99.99%），14mL/min；燃烧气：氢气4mL/min，空气180mL/min；尾吹气：氮气18mL/min；保留时间：腈苯唑为5.33min，RH-9130为6.33min，RH-9129为6.85min。该方法的最低检出量：1×10-10g；最低检出浓度：0.01mg/kg；回收率：水果、土壤中添加腈苯唑、RH-9130、RH-9129 0.1~1.0mg/kg，回收率分别在82.4%~95.3%。相对标准偏差在0.2%~11.6%。